蛋白组学Proteomics

多克隆抗体制备

多肽是指分子结构介于氨基酸和蛋白质之间的一类化合物。自从生物化学家用人工方法合成多肽 40多年以来,多肽的研究取得了很大的的进展。神经紧张肽、生长激素、催产素、胸腺肽、降钙肽、抗菌肽等生物活性肽已广泛应用于医药、保健、食品、化妆品等行业;另外,用多肽代替蛋白来制造抗体的方法,由于省时省力、经济实惠,也已被广泛应用于研究以及诊断领域。博奥生物多肽合成实验室建于 2006年,实验室拥有美国 AAPPTEC公司 Apex396型多肽合成仪、 ThermoFisher公司Q Exactive与LTQ Orbitrap Velos和 HPLC系统。我们拥有多年的多肽合成经验,为客户提供从多肽设计到多肽合成、多肽鉴定和多肽交联等一系列优质的服务。

实验流程| 服务内容| 服务优势| 抗体实例|

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1) 抗原制备:客户可提供蛋白信息,或多肽信息,我们提供多肽合成、纯化及交联载体服务。

2) 抗体制备:每种抗原免疫两只新西兰大耳白兔。三次免疫后用, ELISA方法测定血清效价,如达到 1:50000或以上,取血。提供免疫前后血清及 ELISA检测纪录。

3) 抗体纯化:包括硫酸铵沉淀、 Protein A/G亲和纯化和抗原特异性亲和纯化。

4) 抗体鉴定:包括 ELISA、WB、IP/WB、IP/MS等。

★ 经验丰富,质量可靠:几年来我们已制备了数百个多克隆抗体,积累了丰富的抗体制备及鉴定经验,每个步骤都有完善的 SOP和质控标准。

★ 服务内容全面,套餐灵活多变:从制备抗原、制备抗血清到抗体纯化、抗体鉴定,服务内容一应俱全,并可根据每个客户的不同需要灵活组合多种套餐。

如果我们想获得NAT10蛋白的抗体,①首先从数据库查找NAT10基因蛋白序列,通过专业软件设计2条多肽;②进行多肽合成,通过质谱等质检后,交联KLH载体蛋白;③抗原进行免疫程序,得到多克隆抗血清;④制备多肽亲和柱,进行特异性亲和纯化抗体;⑤进行ELISA、WB、IP/WB、IP/MS等质检,抗体入库。抗体验证结果如下:

多克隆2

SDS-PAGE 130KDa切胶质谱检测结果:

Reference
Score
MW
Accession
Peptide (Hits)
Scan(s)
XC
Sp
RSp
Ions
N-acetyltransferase 10 [Homo sapiens]
350.27
115674.7
13399322
73 (72 0 1 0 0)

多克隆3

SDS-PAGE 130KDa切胶质谱检测结果:

Reference
Score
MW
Accession
Peptide (Hits)
Scan(s)
XC
Sp
RSp
Ions
N-acetyltransferase 10 [Homo sapiens]
340.24
115674.7
13399322
142 (141 1 0 0 0)